PRACTICA 1 ESTERILIZACION

(POR METODO DE AUTOCLAVE)



PRACTICA 2



Elaborar medio de cultivo


Materiales
Matraz de 50 ml.
Vaso de precipitado de 250 ml
.Vaso de precipitado de 50 ml.
Varilla de cristal como agitador
Cajas petri de 5 a 8
EspátulaBalanza
Tape
Envudo de cristal
Torundas de algodón
Papel secante
Medio de cultivo en polvo 450 gr.
Agua destilada


Desarrollo

Rehidratamos según las indicaciones que están presentes en la etiqueta del medio de cultivo la cant6idad necesaria de polvo reactivo para la elaboración de 5 a 8 cajas petrien las que se debe utilizar agua destilada.Para poder rehidratar el polvo del medio de cultivo necesitamos manejar una regla de 3 la cual nos ayudara a sacar el % en gr.Pesamos el medio de cultivo en polvo que vallamos a utilizar usando el vidrio de reloj una ves pesado el polvo se mezcla con a agua solicitada en as 5 a 8 cajas.Para poder mezclar utilizamos el matraz.En su caso dado con u vaso de precipitado, agitando con la varilla de cristal para que no queden grumos una ves terminado este proceso de agitación y mezcla dejamos reposar el tiempo que nos marque el medio de cultivo.En este espacio de tiempo todo el equipo concensaran sus notas del desarrollo.Una ves reposado el producto se tienen ya listos los mecheros de bunsen para poder realizar el proceso de ebullición el cual se le dará un min. De tiempo desde que este empiece a a iniciar, se realiza un pequeño giro de muñequeo por encima de la flama azul del mechero siendo muy cuidadoso en que el producto no se derrame ya que puede ocasionar quemaduras de segundo grado.Se muñequea, se observa el hervor, se retira cuidadosamente y otra ves tomando el tiempo hasta que se cumpla el min. Después se observa, se registra, se deposita en la mesa y se deja enfriar.Ya estado frió el medio líquido tamponeamos con algodón sellando con tape asegurando bien la boquilla del matraz, etiquetamos con el número de mesa y el nombre del medio de cultivo hora y fechaLos encargados del proceso de esterilización se encargan de los medios y del autoclave.Una ves terminando el proceso de esterilización se retira el medio de cultivo del autoclave se deposita en los mecheros los cuales forman el campo de esterilización por radiación.Llenado de caja petri .Para realizar el llenado de las cajas, deben de estar en el campo de esterilización si no se contamina.Con el vaso de precipitado realizamos la actividad de vaseado pero antes esterilizamos la boquilla del vasito.Ya terminado esto, vaseamos la cantidad ala caja.Ya vaseado el material ala caja esta se deja semitapada para que no exista el vapor de agua.Ya estando solidificado el medio, se tapa, se retira y se asegura con tape para etiquetar con los siguientes datos:Nombre del medio de cultivo ,fecha ,mesa ,hora.




PRACTICA 3

Siembras en caja petri en forma de estrias

Materiales
Cajas petri con medio de cultivo ya elaborado
Muestras de desechos como saliva, espacios interdentales, raspado de piel, orina, agua fresca, sangre
.Asa bacteriologica
Mechero de bunsen (2)
Vaso de precipitado (25 ml. de agua )
Papel para vestir mesa
Papel secante
Torundas de algodón
Maskingtape


Desarrollo
1.- Se realiza la toma de una muestra de desechos para sembrarla en forma de estria en caja petri de la siguiente manera.Con el asa bacteriologica tomamos una pequeña muestra del desecho y sembramos de forma estriada en la caja petri.
2.- El asa bacteriologica se pasa por la flama del mechero para esterilizar y volver a realizar el mismo proceso con otra muestra de desechos.
3.- Una vez sembradas las cajas petri se cierran, se etiquetan aplicando los datos de la muestra y el tipo de estria, nombre de la estria sembrada.
4.- Es importante realizar las siembra en caja petri con barilla de cristal a la cual le damos el nombre de SIEMBRA POR DISPERSION.
5.- Una vez etiquetadas las cajas se entregan al encargado (a) del laboratorio para que se les de entrada al proceso de incubación en la estufa para incubar a 37ºC durante 24, 48, 72 horas


PRACTICA 4

Observacion macroscopica del desarrollo de microrganismos en medios de cultivo
, lectura de colonias.

Materiales
asa bacteriologica
Mecheros de bunsen
Vaso de precipitados
Pie de rey o vernier
Torundas de algodón secas y con alcohol

DesarrolloLas cajas de petri ya sembradas son depositadas en el campo de esterilización que se realiza con los dos mecheros hacia la parte media de la mesa.Una vez teniendo el campo, de esterilización se observan los crecimientos de lñas cajas petri ; se registra, lo observado, se abre la caja petri, se registra el olor que despide lo que crecio, el color que presenta 7y se registra con graficos, dibujos o fotografias .


PRACTICA 5


Elaborar frotis para tincion

Materiales
Cajas petri con medio de cultivo
Asa bacteriologica
Vaso de precipitados con agua destilada (25 ml.)
Mecheros de bunsen
Papel secante

Desarrollo

Se toma un portaobjetos limpio para poder realizar en su superficie un frotis fresco con el material de la caja petri “bacteriologica”Con el asa bacteriologica se va a realizar un barrido en el porta en sus parte central, esterilizando primero el asa bacteriologica en la flama del mechero al rojo vivo, se retira, se introduce el vaso de precipitado se toma una gota de agua con el asa se introduce al a caja petri sobre las colonias desarrolladas se toma una pequeña muestra y se deposita en el portaobjetos dandole pequeños movimientos de izquierda a derecha para estender el producto obtenido.Si el frotis se encuentra grueso se vuelve a esterilizar el asa bacteriologica se vuelve a tomar una gota de agua, se deposita en el porta sobre el producto anteriormente depositado y se realiza nuevamente la misma maniobra y asi sucesivamente hasta que quede finalmente delgado.Una vez terminado el proceso de barrido realizamos una maniobra sobre la flama del mechero con el mismo porta sin dejarlo fijamente en la flama a esto lo denominamos fijación de frotis por calor seco a fuego directo.Una vez fijado el frotis queda listo para el proceso de tincion de gram.


PRACTICA 6.

Tincion de gram

Materiales
Caja de petri
Portaobjetos con frotis
Algodón seco Papel secante
Mecheros de bunsen
Aceite de inmersion
Microscopio


Desarrollo

Realizamos el proceso de tincion utilizando la tincion de gram. que anteriormente ya investigamos para aplicar la tecnica correspondiente en la tincion ( 9 pasos con esta tecnica) la que se basa en el tiempo.Una vez teñida la lamina de cristal verificamos que no se queme con la tintura por lo que nos sirve el frotis y como resultado debemos elaborar otro frotis.Si la laminilla en su termino esta bien teñida acudimos a aplicamos una gota de aceite de inmersion lo montamos en la platina del microscopio lo aseguramos con las pinzas de la platina una vez asegurada realizamos el enfoque en 100X para que nuestra observación microscopica de resultado de poder visualizar las bacterias de formas esfericas y de forma de baston ambas se pueden encontrar en una sola pieza 2, 3, 4 piezas en cadenas largas y agrupadas hasta el tercer plano a estas esferas se les denomina cocos.



PRACTICA 7

Observacion microscopia en objetivo 100x con aceite de inmersion

Materiales

Porta objetos con tincion de gramaceite de inmersionmicroscopio

Desarrollo
Una vez tenida la laminilla con el frotis se le aplica una gota de aceite de inmersión para poder observar el objetivo en 100X.En este proceso de observación microscópica tenemos la facilidad de poder observar formas esféricas y bacilos los que nos da como resultado observar las coloraciones que se presentan en la tinción de Gram.La presentación en esferas nos indica que estamos observando bacterias denominadas cocos, donde debemos investigar sus características y nombres de importancia medica.Cuando observamos bastoncitos estamos tratando de identificar bacilos donde encontraremos una gran variedad de ellos de forma estructural.

PRACTICA 8

Prueba de reacciones febriles en cerologia

Materiales
1.-Lámina de cristal para reacciones febriles
2.-Tubo de ensaye con tapón rojo estéril
3.-Palillos de madera 2 o 3 por cada uno
4.-Torundas de algodón
5.- Centrifuga
6.- Microscopio
7.-Pipeta Pasteur con lóbulo
8.- Papel secante
9.- Papel para mesa de laboratorio
10.- Torniquete
11.-Gradillas
12.-ReactivosFebriclinHO AB Bruc. Proteus 0x19º
13.-Paciente y sangre fresca

Desarrollo

Al inicio de esta practica se observe la técnica de venopuncion para la extracción de sangre ,se coloco la sangre ya extraida en tuvos de tapon morado y rojo, se coloco en la centrifuga el tuvo con tapon rojo para asi poderse separar el plasma ,después se saco de la centrifuga y ya con el plasma separado de coloco el plasma en un tuvo transparente ,luego en una placa de cristal escavada con una pipeta pasteur se punteo plasma y con un palillo de madera se Mezclo el plasma con observe HO A B para despues observar a trasluz la observe de aglutination , luego se observe en el microscopio en el objetivo 10x

PRACTICA 9


Prueba de aglutinacion en sangre

Materiales

1.-Tubo de ensaye con tapón morado
2.-Placa de porcelana excavada
3.-Wiltrobe
4.-Vasal
5.-Centrifuga
6.-Pipeta Pasteur y lóbulo
7.-Palillos de madera
8.- Torundas de algodón alcoholizadas
9.-centrifuga
10.-papel secante y para mesa de laboratorio
11.- Gradilla
12.Reactivos: Tipificadores A, b, d13.-jeringa

Desarrollo.

Se inicio la practica con la tecnica de venopuncion se extrajo 8ml de sangre despues se traspaso al tuvo con tapon morado luego con la pipeta pasteur se punteo en la placa escabada , ya estando las gotas se le aplican una gota de reactivo tipificador A color Amarillo ,B color azul y D color trasparente se toman despues palillos de madera y se mezclan las gotas luego de esto se empeso a observar la aglutinacion que se veia como si estuviera cortada la sangre ya observada la aglutinacion se lavaron los materiales y se guardaron.